MicrOFF^TM miRNA antagomir是经过特殊化学修饰的miRNA拮抗剂，可直接注射于动物体内，用于抑制内源性miRNA。与普通抑制剂相比，动物用miRNA antagomir具有更高的稳定性和抑制效果，更易通过细胞膜、细胞间隙而富集于靶细胞。在动物实验中antagomir通常可以通过系统或局部注射等方法进行给药。关于科研实验中的给药方式一般没有固定的模式，给药方式应该根据具体的实验灵活设计，在实际实验过程中不断调整调整和优化。

本期文章小编给大家带来的是关于动物用miRNA antagomir给药方式的客户应用案例，希望能够对正在或即将要做动物实验的各位小伙伴有一定的帮助！

 

锐博生物miRNA antagomir

中文名：miRNA拮抗剂

功能：抑制内源性的miRNA

纯化方式：in vivo（又称Standard in vivo）

稳定性：经特殊化学修饰，稳定性高

给药方式：局部给药(5-20 nmol)；系统给药(50-200 nmol)

作用方式：单链RNA，通过与体内的成熟miRNA强竞争性结合，阻止miRNA与其靶基因mRNA的互补配对，抑制miRNA发挥作用

 

 

客户应用案例1：

Nature Communications（IF17.694）丨Vascular endothelium deploys caveolin-1 to regulate oligodendrogenesis after chronic cerebral ischemia in mice

 

疾病模型：脑白质疏松（选择成年雄性小鼠进行双侧颈动脉狭窄BCAS手术，以构建BCAS小鼠模型。简单来说，仔细解剖两根颈总动脉CCAs，并通过中线切口暴露。将内径为0.18 mm的微线圈缠绕在一侧的CCA上，30分钟后在另一侧再次缠绕。手术期间直肠温度维持在36.5℃至37.5℃之间。手术后，小鼠得到了照顾，并可以自由地获得水和食物）
 

动物模型：BCAS小鼠模型（分为4组，WT BCAS miR-3074-1-3p antagomir组、WT BCAS antagomir NC组、Cav-1−/− BCAS miR-3074-1-3p antagomir组、Cav-1−/− BCAS antagomir NC组）

给药方式：胼胝体注射

给药剂量：2 μg

给药频率：每天注射1次，连续14天

 

Fig1. 野生型BCAS小鼠注射miR-3074-1-3p antagomir增加内皮细胞Cav-1水平，抑制HSP90α分泌，并显著恢复了TJs水平和结构；但注射antagomir不影响Cav-1−/− BCAS小鼠的HSP90α增量和TJs损失

 

参考文献：Zhao Y, Zhu W, Wan T, et al. Vascular endothelium deploys caveolin-1 to regulate oligodendrogenesis after chronic cerebral ischemia in mice[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 6813.

 

 

   

客户应用案例2：

PNAS（IF12.779）丨Glutamate–GABA imbalance mediated by miR-8-5p and its STTM regulates phase-related behavior of locusts

 

疾病模型：蝗灾形成、蝗虫的相位相关行为（2d龄四龄群居若虫）

动物模型：群居蝗虫（分为2组，antagomir-8-5p组、NC组）

给药方式：脑部注射

给药剂量：42 pmol，200 mM

给药频率：所有注射均在解剖镜下使用具有玻璃微量移液管尖的纳升注射器进行给药。处理若虫在24或48h后进行行为分析。

 

Fig2. 脑部注射antagomir-8-5p（mir-8-5p At）群居蝗虫的Pgreg值中位数从0.9变为0.28，表明从群居状态到孤独状态的行为发生了显著变化

 

参考文献：Yang M, Du B, Xu L, et al. Glutamate–GABA imbalance mediated by miR-8-5p and its STTM regulates phase-related behavior of locusts[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2023, 120(1): e2215660120.

 

 

   

客户应用案例3：

PNAS（IF12.779）丨Histone methylation-mediated microRNA-32-5p down-regulation in sensory neurons regulates pain behaviors via targeting Cav3. 2 channels

 

疾病模型：神经性疼痛（经口内入路，通过左眶下神经慢性压迫性损伤（CCI-ION）产生三叉神经性疼痛模型。即在用异氟醚isoflurane麻醉后，从第一磨牙开始，沿着大鼠颊粘膜中的牙龈囊边缘做一个约1厘米的切口。使用玻璃棒在眶下孔附近解剖左侧ION。两条缝合线（4-0丝）松散地缠绕在ION周围，彼此相距3-4毫米。sham组仅接受单侧神经暴露，使用相同的程序而不进行结扎）

动物模型：大鼠三叉神经性疼痛模型（随机分为3组，分别为intact、antagomir-32、antagomir-NC）

给药方式：三叉神经节内注射

给药剂量：50μM

给药频率：针尖端于三叉神经节（TG）的内侧， 3μl试剂在5min内缓慢地注入，注射后保持原位10 min

 

Fig3. 三叉神经节内注射 antagomir-32-5p（antagomir-32）诱导了完整大鼠机械性疼痛超敏反应

 

参考文献：Qi R, Cao J, Sun Y, et al. Histone methylation-mediated microRNA-32-5p down-regulation in sensory neurons regulates pain behaviors via targeting Cav3. 2 channels[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2022, 119(14): e2117209119.

 

 

   

客户应用案例4：

Cell Reports（IF9.995）丨Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis

 

疾病模型：肥胖、内皮细胞炎症和动脉粥样硬化（6-8周龄雄性ApoE-/-小鼠，喂养3-4个月的WD，WD喂养2个月后，尾静脉注射agomiRs）

动物模型：雄性ApoE-/-小鼠模型（分为2组，antagomiR-27b-3p组、NC antagomiR组）

给药方式：尾静脉注射

给药剂量：0.3 mol/kg

给药频率：每周一次，持续1个月

 

Fig4. 尾静脉注射antagomiR-27b-3p没有减缓ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成

 

参考文献：Tang Y, Yang L J, Liu H, et al. Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis[J]. Cell Reports, 2023, 42(1): 111948.

 

 

   

客户应用案例5：

Journal of Neuroinflammation（IF9.587）丨Transcriptome profiling of microRNAs reveals potential mechanisms of manual therapy alleviating neuropathic pain through microRNA-547-3p-mediated Map4k4/NF-κb signaling pathway

 

疾病模型：腰椎间盘突出、神经性疼痛（简单地说，将大鼠麻醉并从右侧钝性分离椎旁肌肉，露出L4和L5椎间孔。将两根长4mm、直径0.6 mm的L型不锈钢棒分别植入L4和L5椎间孔，与脊柱成30°角，对DRG产生稳定压力，以构建背根神经节慢性压迫CCD模型）

动物模型：背根神经节慢性压迫CCD大鼠模型（分为2组，NC组、miR-547-3p antagomir组）

给药方式：鞘内注射

给药剂量：10nmol

给药频率：术后第4天开始，每周2次，注射6次

 

Fig5. 鞘内注射miR-547-3p antagomir的假手术组大鼠PWT（机械痛觉过敏）和PWL（热痛觉过敏）呈下降趋势直到第14天，并且明显低于从第7天起在同一时间点注射antagomir对照的假手术组

 

参考文献：Yao C, Ren J, Huang R, et al. Transcriptome profiling of microRNAs reveals potential mechanisms of manual therapy alleviating neuropathic pain through microRNA-547-3p-mediated Map4k4/NF-κb signaling pathway[J]. Journal of Neuroinflammation, 2022, 19(1): 211.

 

 

   

客户应用案例6：

Diabetes Research and Clinical Practice（IF8.180）丨Demethylation of miR-299-5p by aerobic exercise relieves insulin resistance in the vascular endothelium by repressing resistin

 

疾病模型：2型糖尿病、胰岛素抵抗IR（从88只雄性7周龄C57BL / 6N小鼠中随机选择8只作为正常对照，并给予正常饮食12周，而其他80只小鼠给予45%Kcal高脂肪饮食12周以建立IR小鼠模型。12周后，通过葡萄糖耐量试验GTT和胰岛素耐量试验ITT评估IR模型）

动物模型：IR小鼠模型（分为2组，NC antagomir组、miR-299-5p antagomir组）

给药方式：尾静脉注射

给药剂量：50 mg/kg

给药频率：在IR模型的第四周开始，每隔一天注射一次，共5次

 

Fig6. 注射miR-299-5p antagomir减弱了IR诱导小鼠的葡萄糖耐量和胰岛素敏感性

 

参考文献：Cai Y, Wang M, Zong Y, et al. Demethylation of miR-299-5p by aerobic exercise relieves insulin resistance in the vascular endothelium by repressing resistin[J]. Diabetes Research and Clinical Practice, 2023, 195: 110176.

 

更多动物用miRNA antagomir应用案例持续更新中，敬请期待……