01

CRISPR/Cas9筛选揭示miR-3689a-3p通过抑制CCS/ SOD1依赖性线粒体氧化应激在肝细胞癌中调节索拉非尼耐药

 

发表期刊：Drug Resist Updat

影响因子：24.3

发表时间：2023年11月6日

 

目的：索拉非尼在肝细胞癌（HCC）中的治疗效果因耐药性的发展而受到损害。本研究旨在鉴定基因组水平上导致索拉非尼耐药的关键microRNA (miRNA)。

 

结果：CRISPR/Cas9筛选发现miR-3689a-3p是索拉非尼敏感性HCC中上调最多的miRNA。miR-3689a-3p的敲低显著增加了索拉非尼的耐药性，而其过表达则使HCC对索拉非尼治疗的反应敏感。蛋白质组学分析表明，miR-3689a-3p的作用与铜依赖性线粒体超氧化物歧化酶1型(SOD1)活性有关。机制上，miR-3689a-3p靶向细胞内铜伴侣超氧化物歧化酶(CCS)的3'UTR并抑制其表达。结果，miR-3689a-3p破坏了细胞内铜运输，并减少了SOD1介导的线粒体氧化应激的清除，最终导致索拉非尼治疗导致HCC细胞死亡。CCS过表达减弱了HCC中索拉非尼的反应。临床上，miR-3689a-3p在HCC中下调，并预示HCC患者的预后良好。

 

结论：本研究结果为miR-3689a-3p作为一种正调节因子和改善索拉非尼HCC治疗的潜在药物靶点提供了全面的证据。

 

Fig1. miR-3689a-3p调节HCC中索拉非尼的敏感性

 

原文链接：

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37924725/

 

02

MicroRNA-200负载脂质纳米颗粒促进典型MicroRNA缺陷小鼠的肠上皮再生

 

发表期刊：ACS Nano

影响因子：17.1

发表时间：2023年11月8日

 

肠上皮在损伤后会经历再生，这一过程的破坏可能导致炎症性肠病和肿瘤发生。隐窝中的肠干细胞（ISCs）对于维持肠上皮稳态和促进肠上皮损伤后的再生至关重要。然而，作为microRNA (miRNA)生物发生的关键组成部分，DGCR8在肠道再生中的确切作用仍然知之甚少。本研究提供了令人信服的证据，证明上皮miRNAs在遭受5-FU或辐射诱导损伤小鼠肠道再生中发挥着不可或缺的作用。通过对Dgcr8缺陷类器官中miRNA功能的全面汇总筛选，研究人员观察到miR-200家族的缺失导致p53通路的过度激活，从而减少ISCs并损害上皮再生。值得注意的是，在活动性溃疡性结肠炎(UC)患者的结肠组织中证实了miR-200家族的下调和p53通路的过度激活。最重要的是，在小鼠急性损伤后，通过口服携带miR-200的脂质纳米粒子(LNP)瞬时供应miR-200可恢复ISCs，并促进肠道再生。本研究表明，miR-200/p53通路是miR-200家族水平降低的活动性UC患者的一个有希望的治疗靶点。此外，本研究结果表明，LNP-miRNAs的临床应用可以提高现有肠道疾病治疗方式的有效性、安全性和可接受性。

 

Fig2. 携带miR-200的脂质纳米颗粒在促进小鼠急性损伤后肠道再生中的作用

 

原文链接：

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37939210/

 

 

03

靶向CXCR4的细胞特异性microRNA阻遏物可改善小鼠动脉粥样硬化

 

发表期刊：Sci Transl Med

影响因子：17.1

发表时间：2023年11月1日

 

内皮细胞 (ECs) 和血管平滑肌细胞 (VSMCs) 中的CXC趋化因子受体4(CXCR4)对于血管完整性至关重要。CXCR4在血管细胞中的动脉粥样硬化保护功能可能会被其他非血管细胞类型中的动脉粥样硬化功能所抵消。因此，如果要将CXCR4受体用作治疗动脉粥样硬化和其他血管疾病的治疗靶点，那么细胞特异性增强血管细胞中CXCR4功能的策略至关重要。本研究将miR-206-3p鉴定为一种血管特异性CXCR4阻遏物，并利用了一种靶位点阻断剂(CXCR4-TSB)在体外和体内破坏了miR-206-3p与CXCR4的相互作用。在体外，CXCR4-TSB可增强人和小鼠ECs和VSMCs中的CXCR4表达，以调节细胞活力、增殖和迁移。在Apoe缺陷小鼠中系统递送CXCR4-TSB可增强血管壁ECs和VSMCs中Cxcr4的表达，降低血管通透性和单核细胞对内皮的粘附，并减弱饮食诱导的动脉粥样硬化的发展。CXCR4-TSB还增加了B细胞中CXCR4的表达，证实了其在这种细胞类型中的动脉粥样硬化保护作用。对人类动脉粥样硬化斑块样本的分析显示，与早期病变相比，晚期病变中CXCR4表达减少，miR-206-3p表达增加，支持了miR-206-3p-CXCR4相互作用在人类疾病中的作用。用靶点阻断剂以细胞特异性方式破坏miR-206-3p–CXCR4相互作用是一种潜在的治疗方法，可用于治疗动脉粥样硬化和其他血管疾病。

 

Fig3. 鉴定miR-206-3p作为血管细胞中的CXCR4阻遏物

 

原文链接：

https://www.science.org/doi/10.1126/scitranslmed.adf3357

 

04

阻断miR528功能可促进柳枝稷分蘖和再生

 

发表期刊：Plant Biotechnol J

影响因子：13.8

发表时间：2023年11月6日

 

据报道，miRNAs是涉及多种植物物种广泛生物过程的关键调节因子，但它们在柳枝稷（一种重要的生物燃料和饲料作物）中的功能很大程度上未知。本研究报道了在柳枝稷中扩增到4个拷贝的miR528在控制分蘖数和刈割后再生速率等生物量性状中的新功能。通过表达短串联靶标模拟物(STTM)来阻断miR528活性可提高分蘖数和刈割后的再生速度。来自基因组编辑的四倍pvmir528突变系也表现出了此类改善的性状。降解组和RNA-seq分析结合原位杂交测定表明，编码Cu/Zn-SOD酶的两个miR528靶点的上调可能是pvmir528突变体分蘖和再生性状改善的原因。此外，C3和C4单子叶植物物种中存在miR528-SOD相互作用的自然变异，这意味着miR528-SOD模块在单子叶植物进化过程中具有独特的调节强度。总的来说，本研究数据阐明了miR528在控制生物量性状中的新作用，并为遗传操作介导的作物改良提供了新的靶点。

 

Fig4. 通过STTM或CRISPR-Cas9介导的基因组编辑阻断柳枝稷中的miR528活性显著增加了分蘖数量和生物量

 

原文链接：

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37929781/

 

05

中隔miR-132在社交恐惧消退和催产素介导的逆转中的功能参与

 

发表期刊：Mol Psychiatry

影响因子：11.0

发表时间：2023年11月8日

 

社会互动对于哺乳动物的生存和进化至关重要。社会行为失调通常会导致精神病理学，例如社交焦虑症，表现为强烈的恐惧和回避社交场合。使用社交恐惧调节（SFC）范式，研究人员分析了社交恐惧获得和消退后，miR-132-3p和miR-124-3p在中隔（对于社交偏好和回避行为至关重要的大脑区域）内的表达水平。本研究发现SFC动态地改变了两种microRNAs。使用药理学策略、抑制miR-132-3p、病毒过表达miR-132-3p以及shRNA介导的miR-132-3p敲低（特别是在催产素受体阳性神经元内）的体内功能方法证实了中隔miR-132-3p不仅在社交恐惧消除中起关键作用，而且在催产素诱导的社交恐惧逆转中也起关键作用。此外，Argonaute-RNA-免疫共沉淀-微阵列分析以及靶标mRNA和蛋白质的进一步体外和体内定量显示，生长分化因子-5 (Gdf-5)是miR-132-3p的靶标。GDF-5的中隔应用损害了社交恐惧的消退，表明其在社交恐惧逆转中的功能参与。总之，本研究发现中隔miR-132-3p及其下游靶标Gdf-5调节社交恐惧表达，并可能介导催产素诱导的社交恐惧逆转。

 

Fig5. 研究模型示意图

 

原文链接：

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37938765/