MicrOFF^TM miRNA antagomir是经过特殊化学修饰的miRNA拮抗剂，可直接注射于动物体内，用于抑制内源性miRNA。与普通抑制剂相比，动物用miRNA antagomir具有更高的稳定性和抑制效果，更易通过细胞膜、细胞间隙而富集于靶细胞。在动物实验中antagomir通常可以通过系统或局部注射等方法进行给药。关于科研实验中的给药方式一般没有固定的模式，给药方式应该根据具体的实验灵活设计，在实际实验过程中不断调整调整和优化。

 

本期文章小编给大家带来的是关于动物用miRNA antagomir给药方式的客户应用案例，希望能够对正在或即将要做动物实验的各位小伙伴有一定的帮助！

 

锐博生物miRNA antagomir

中文名：miRNA拮抗剂

功能：抑制内源性的miRNA

纯化方式：in vivo（又称Standard in vivo）

稳定性：经特殊化学修饰，稳定性高

给药方式：局部给药(5-20 nmol)；系统给药(50-200 nmol)

作用方式：单链RNA，通过与体内的成熟miRNA强竞争性结合，阻止miRNA与其靶基因mRNA的互补配对，抑制miRNA发挥作用

 

 

客户应用案例1：

ACS Nano（IF17.1）丨Biomodified Extracellular Vesicles Remodel the Intestinal Microenvironment to Overcome Radiation Enteritis

疾病模型：放射性肠炎（BALB/c小鼠接受5 Gy / 9 Gy / 11 Gy的全身照射（TBI）或12.5 Gy / 5f的全腹部照射（WAI），构建肠道损伤小鼠模型）

动物模型：肠道损伤小鼠模型（分为2组，分别为antagomir-142、antagomir-NC）

给药方式：腹腔注射

给药剂量：2500 nmol/kg

给药频率：每2天注射一次，总共3次

 

Fig1. 注射antagomir-142干扰了Exo-IR介导的对辐射引起的肠道和上皮损伤的防御

 

参考文献：Li H, Zhao S, Jiang M, et al. Biomodified Extracellular Vesicles Remodel the Intestinal Microenvironment to Overcome Radiation Enteritis[J]. ACS nano, 2023.

 

 

  

客户应用案例2：

Advanced Science（IF15.1）丨Tumor Cell Derived Lnc‐FSD2‐31: 1 Contributes to Cancer‐Associated Fibroblasts Activation in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Progression through Extracellular Vesicles Cargo MiR‐4736

疾病模型：胰腺导管腺癌（使用8周龄KPC (LSL-KrasG12D/+, LSL-Trp53R172H/+, Pdx-1-Cre)转基因小鼠作为同基因原位肿瘤模型）

动物模型：KPC转基因小鼠模型（分为2组，分别为miR-4736 antagomir、antagomir-NC）

给药方式：腹腔注射

给药剂量：50 nmol

给药频率：每2周注射一次，直到首例死亡

 

Fig2. 注射miR-4736 antagomir导致肿瘤生长停滞，表现为肿瘤体积变小

 

参考文献：Geng X, Li L, Luo Y, et al. Tumor Cell Derived Lnc‐FSD2‐31: 1 Contributes to Cancer‐Associated Fibroblasts Activation in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Progression through Extracellular Vesicles Cargo MiR‐4736[J]. Advanced Science, 2023, 10(10): 2203324.

 

 

   

客户应用案例3：

Chemical Engineering Journal（IF15.1）丨Simvastatin-enhanced bioinspired exosome mimetics regulate osteogenesis and angiogenesis for the treatment of glucocorticoid-induced osteonecrosis of the femoral head

疾病模型：股骨头坏死（构建GIONFH大鼠模型作为实验动物模型）

动物模型：GIONFH大鼠模型（分为2组，分别为miR-29b-3p antagomir、NC-antagomir）

给药方式：髓内注射

给药剂量：5 nmol

给药频率：每7天注射一次，注射3次

 

Fig3. 注射miR-29b-3p antagomir (antagomir-29b) 逆转了SIM-MSCs-EM在调节GIONFH大鼠成骨和血管生成中的作用

 

参考文献：Jiang H, Lou C, Jiang L, et al. Simvastatin-enhanced bioinspired exosome mimetics regulate osteogenesis and angiogenesis for the treatment of glucocorticoid-induced osteonecrosis of the femoral head[J]. Chemical Engineering Journal, 2023: 144729.

 

 

 

客户应用案例4：

Science Advances（IF13.6）丨Tau pathology epigenetically remodels the neuron-glial cross-talk in Alzheimer’s disease

疾病模型：阿尔茨海默氏病（使用3周龄C57小鼠作为WT模型）

动物模型：C57小鼠模型（分为2组，分别为NC anta、miR-133a-3p anta）

给药方式：海马CA3区注射

给药剂量：2 ul, 100 μM

给药频率：使用Hamilton微量注射器以0.2 μl/min的注射速率向海马CA3区立体定向注射，针头在动物的大脑中停留10 min，然后慢慢取出

 

Fig4. 注射miR-133a-3p anta（miR-133a-3p antagomir）导致小鼠中的反应性星形胶质细胞和小胶质细胞的数量显著增加

 

参考文献：Zhou L T, Liu D, Kang H C, et al. Tau pathology epigenetically remodels the neuron-glial cross-talk in Alzheimer’s disease[J]. Science Advances, 2023, 9(16): eabq7105.

 

 

   

客户应用案例5：

Journal of the American Society of Nephrology（IF13.6）丨miR-147 Represses NDUFA4, Inducing Mitochondrial Dysfunction and Tubular Damage in Cold Storage Kidney Transplantation

疾病模型：冷藏移植诱导的肾损伤（将供体小鼠的左肾切除，用冷的肝素化UW溶液冲洗，并在冷的UW溶液中冰水浴保存10小时。然后，摘除受体的左肾，移植供肾）

动物模型：冷藏肾移植小鼠模型（分为2组，分别为anti-miR-147、negative control）

给药方式：尾静脉注射

给药剂量：10 nmol

给药频率：移植后，连续注射3天

 

Fig5. 注射anti-miR-147可改善移植物功能并减少移植物损伤和炎症

 

参考文献：Zhu J, Xiang X, Hu X, et al. miR-147 Represses NDUFA4, Inducing Mitochondrial Dysfunction and Tubular Damage in Cold Storage Kidney Transplantation[J]. Journal of the American Society of Nephrology, 2023, 34(8): 1381-1397.

 

 

  

客户应用案例6：

Autophagy（IF13.3）丨CircEPS15, as a sponge of MIR24-3p ameliorates neuronal damage in Parkinson disease through boosting PINK1-PRKN-mediated mitophagy

疾病模型：帕金森病（使用A53T小鼠MPTP PD模型作为实验模型）

动物模型：A53T小鼠MPTP PD模型（分为4组，anta-Mir24-3p negative control (NC) + Saline、anta-Mir24-3p + Saline、anta-Mir24-3p NC + MPTP、anta-Mir24-3p + MPTP）

给药方式：中脑注射

给药剂量：2.5 μL/一侧，1 nmol

给药频率：显微注射1次

 

Fig6. 注射anta-Mir24-3p对PD实验模型具有神经保护作用

 

参考文献：Zhou Y, Liu Y, Kang Z, et al. CircEPS15, as a sponge of MIR24-3p ameliorates neuronal damage in Parkinson disease through boosting PINK1-PRKN-mediated mitophagy[J]. Autophagy, 2023: 1-18.

 

 

   

客户应用案例7：

Redox Biology（IF11.4）丨Translocator protein 18 kDa regulates retinal neuron apoptosis and pyroptosis in glaucoma

疾病模型：青光眼（通过将野生型SD大鼠的眼内压提高到120 mmHg，并维持45 min来建立大鼠ph-IOP模型）

动物模型：ph-IOP大鼠模型（分为6组，分别为ph-IOP、ph-IOP+miR-1839 agomir (Ago)、ph-IOP+miR-1839 antagomir (Anta)、ph-IOP+Ago+Ier2 siRNA (dIer2)、ph-IOP+Anta+dIer2、ph-IOP+dIer2+TSPO-siRNA (dTSPO)）

给药方式：玻璃体内注射

给药剂量：5 nmol/eye

给药频率：在解剖显微镜下通过玻璃体内注射，注射1次

 

Fig7. 注射miR-1839 antagomir (Anta)可进一步激活NLRP3/caspase1/GSDMD表达

 

参考文献：Zeng Z, You M, Rong R, et al. Translocator protein 18 kDa regulates retinal neuron apoptosis and pyroptosis in glaucoma[J]. Redox Biology, 2023, 63: 102713.

 

 

   

客户应用案例8：

Cancer Research（IF11.2）丨circFNDC3B accelerates vasculature formation and metastasis in oral squamous cell carcinoma

疾病模型：口腔鳞状细胞癌（将40只雌性BALB/c裸鼠随机分为8组。裸鼠适应环境后，分别向第1组、第2-4组、第5组和第6-8组裸鼠各小鼠的舌粘膜注射5×106个HSC3-sh-NC、HSC3-sh-circFNDC3B、CAL27-LV-NC和CAL27-LV-cicFNDC3B细胞，以构建抑制抑制小鼠模型。在植入后第7天，将贝伐珠单抗（每只小鼠0.1mg）注射到第3组和第7组小鼠中；将miR-181c-5p antagomir注射到第4组和第8组小鼠，其他组小鼠注射PBS）

动物模型：异种移植小鼠模型（分为8组，sh-NC、sh-circRNA、sh-circRNA + BEV、sh-circRNA + miR-181c-5p antagomir、LV-NC、LV-circRNA、LV-circRNA + BEV、LV-circRNA + miR-181c-5p antagomir）

给药方式：瘤内注射

给药剂量：5 nmol

给药频率：每4天注射一次，总共注射4次

 

Fig8. 注射miR-181c-5p antagomir加重了LV-circFNDC3B促进肿瘤相关淋巴管生成和LN转移的作用

 

参考文献：Li X, Wang C, Zhang H, et al. circFNDC3B accelerates vasculature formation and metastasis in oral squamous cell carcinoma[J]. Cancer Research, 2023, 83(9): 1459-1475.

 

 

   

客户应用案例9：

Molecular Therapy-Nucleic Acids（IF8.8）丨Role of miR-300-3p in Leydig cell function and differentiation: A therapeutic target for obesity-related testosterone deficiency

疾病模型：肥胖相关睾酮缺乏症（使用C57BL/6J小鼠作为实验模型以研究miR-300-3p在体内的功能）

动物模型：C57BL/6J小鼠模型（分为3组，Ctrl (PBS)、NC-Anta、300-Anta）

给药方式：睾丸注射

给药剂量：15 μL，1.875nmol

给药频率：将微量注射器从小鼠阴囊外插入三分之一的睾丸中，注射速率为15μL/min。注射后，将针头放置30秒，直到药物完全吸收。

 

Fig9. 注射miR-300-3p antagomir（300-Anta）显著增加了血清睾酮的产生，降低睾丸间质中的脂滴积聚

 

参考文献：Liang J, Chen D, Xiao Z, et al. Role of miR-300-3p in Leydig cell function and differentiation: A therapeutic target for obesity-related testosterone deficiency[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2023, 32: 879-895.

 

 

   

客户应用案例10：

Cell Reports（IF8.8）丨Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis

疾病模型：内皮炎症和动脉粥样硬化（将6-8周龄雄性ApoE-/-小鼠给予WD(42%脂肪，0.2%总胆固醇)3-4个月，作为实验动物模型）

动物模型：ApoE-/-小鼠模型（分为2组，antamiR-NC、antamiR-27b-3p）

给药方式：尾静脉注射

给药剂量：0.3 mol/kg

给药频率：每周1次，持续1个月

 

Fig10. 注射antamiR-27b-3p没有减缓ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成

 

参考文献：Tang Y, Yang L J, Liu H, et al. Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis[J]. Cell Reports, 2023, 42(1).

 

更多动物用miRNA agomir应用案例持续更新中，敬请期待……