MicrON^TM miRNA agomir是经过特殊化学修饰的miRNA激动剂，可直接注射于动物体内，用于模仿内源性miRNA。相比细胞用miRNA mimic，动物用miRNA agomir具有更高的稳定性和miRNA活性，更易通过细胞膜、细胞间隙而富集于靶细胞。在动物实验中agomir通常可以通过系统或局部注射等方法进行给药。关于科研实验中的给药方式一般没有固定的模式，给药方式应该根据具体的实验灵活设计，在实际实验过程中不断调整调整和优化。

 

本期文章小编给大家带来的是关于动物用miRNA agomir给药方式的客户应用案例，我们也将不定时地更新更多miRNA agomir在动物体内的应用策略，希望能够对正在或即将要做动物实验的各位小伙伴有一定的帮助！

 

锐博生物miRNA agomir

中文名：miRNA激动剂

功能：模仿内源性的miRNA

纯化方式：in vivo（Standard in vivo）

稳定性：经特殊化学修饰，稳定性高

给药方式：局部给药(1-10 nmol)；系统给药(5-20 nmol)

作用方式：双链RNA，作用链为正义链，通过模拟miRNA进入miRISC复合物来调节靶mRNA的表达而发挥作用

 

 

   

客户应用案例1：

Signal Transduction and Targeted Therapy（IF39.3）丨A Kaposi’s sarcoma-associated herpes virus-encoded microRNA contributes to dilated cardiomyopathy

疾病模型：扩张型心肌病（对于CVB3感染，BALB/c小鼠腹腔注射0.1mL含有105 50%组织培养感染剂量（TCID50）CVB3的 PBS以诱导病毒性心肌炎。）

动物模型：CVB3诱导的病毒性心肌炎小鼠模型（分为4组，agomir-8-5p组、NC组）

给药方式：尾静脉注射

给药剂量：20 nmol

给药频率：在CVB3感染前连续3天

 

Fig1. 尾静脉注射kshv-miR-K12-1-5p agomiR增加了心脏中的CVB3复制，以及心脏组织中炎症细胞的浸润和血清炎症细胞因子的水平，并加重了心脏组织的纤维化水平，以及心输出量减少和舒张功能障碍

 

参考文献：Zhao Y, Li H, Du H, et al. A Kaposi’s sarcoma-associated herpes virus-encoded microRNA contributes to dilated cardiomyopathy[J]. Signal Transduction and Targeted Therapy, 2023, 8(1): 226.

 

 

客户应用案例2：

Science Advances（IF13.6）丨Tau pathology epigenetically remodels the neuron-glial cross-talk in Alzheimer’s disease

疾病模型：阿尔茨海默氏病（使用5周龄3×Tg小鼠作为AD实验模型）

动物模型：3×Tg小鼠模型（分为4组，分别为WT、3×Tg、3×Tg A-miR-133a-3p、3×Tg shRNA-A1R）

给药方式：海马CA3区注射

给药剂量：2 ul, 100 μM

给药频率：使用Hamilton微量注射器以0.2 μl/min的注射速率向海马CA3区立体定向注射，针头在动物的大脑中停留10 min，然后慢慢取出

 

Fig2. 注射A-miR-133a-3p（agomir miR-133a-3p）可挽救3×Tg小鼠的记忆缺陷和树突异常

 

参考文献：Zhou L T, Liu D, Kang H C, et al. Tau pathology epigenetically remodels the neuron-glial cross-talk in Alzheimer’s disease[J]. Science Advances, 2023, 9(16): eabq7105.

 

 

客户应用案例3：

Autophagy（IF13.3）丨CircEPS15, as a sponge of MIR24-3p ameliorates neuronal damage in Parkinson disease through boosting PINK1-PRKN-mediated mitophagy

疾病模型：帕金森病（使用亚急性小鼠PD模型作为实验模型）

动物模型：亚急性小鼠PD模型（分为6组，ago-Mir24-3p negative control (NC) + Saline、ago-Mir24-3p + Saline、ago-Mir24-3p + CircEPS15-GFP + Saline、ago-NC + MPTP、ago-Mir24-3p + MPTP、ago-Mir24 -3p + CircEPS15-GFP + MPTP）

给药方式：中脑注射

给药剂量：2.5 μL/一侧，1 nmol

给药频率：显微注射1次

 

Fig3. 注射Mir24-3p agomir导致中脑中的TH+和Nissl+神经元明显减少，而circEPS15过表达则逆转了这些影响

 

参考文献：Zhou Y, Liu Y, Kang Z, et al. CircEPS15, as a sponge of MIR24-3p ameliorates neuronal damage in Parkinson disease through boosting PINK1-PRKN-mediated mitophagy[J]. Autophagy, 2023: 1-18.

 

 

客户应用案例4：

Redox Biology（IF11.4）丨Translocator protein 18 kDa regulates retinal neuron apoptosis and pyroptosis in glaucoma

疾病模型：青光眼（通过将野生型SD大鼠的眼内压提高到120 mmHg，并维持45 min来建立大鼠ph-IOP模型）

动物模型：ph-IOP大鼠模型（分为6组，分别为ph-IOP、ph-IOP+miR-1839 agomir (Ago)、ph-IOP+miR-1839 antagomir (Anta)、ph-IOP+Ago+Ier2 siRNA (dIer2)、ph-IOP+Anta+dIer2、ph-IOP+dIer2+TSPO-siRNA (dTSPO)）

给药方式：玻璃体内注射

给药剂量：2 nmol/eye

给药频率：在解剖显微镜下通过玻璃体内注射，注射1次

 

Fig4. 注射miR-1839 agomir (Ago)可抑制ph-IOP诱导的NLRP3/caspase1/GSDMD通路激活

 

参考文献：Zeng Z, You M, Rong R, et al. Translocator protein 18 kDa regulates retinal neuron apoptosis and pyroptosis in glaucoma[J]. Redox Biology, 2023, 63: 102713.

 

 

客户应用案例5：

Molecular Therapy-Nucleic Acids（IF8.8）丨Role of miR-300-3p in Leydig cell function and differentiation: A therapeutic target for obesity-related testosterone deficiency

疾病模型：肥胖相关睾酮缺乏症（使用C57BL/6J小鼠作为实验模型以研究miR-300-3p在体内的功能）

动物模型：C57BL/6J小鼠模型（分为3组，Ctrl (PBS)、NC-Ago、300-Ago）

给药方式：睾丸注射

给药剂量：15 μL，1.875nmol

给药频率：将微量注射器从小鼠阴囊外插入三分之一的睾丸中，注射速率为15μL/min。注射后，将针头放置30秒，直到药物完全吸收。

 

Fig5. 注射miR-300-3p agomir（300-Ago）显著下调血清睾酮水平，导致睾丸间质中积累了大量脂滴

 

参考文献：Liang J, Chen D, Xiao Z, et al. Role of miR-300-3p in Leydig cell function and differentiation: A therapeutic target for obesity-related testosterone deficiency[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2023, 32: 879-895.

 

 

客户应用案例6：

Cell Reports（IF8.8）丨Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis

疾病模型：内皮炎症和动脉粥样硬化（将6-8周龄雄性ApoE-/-小鼠给予WD(42%脂肪，0.2%总胆固醇)3-4个月，作为实验动物模型）

动物模型：ApoE-/-小鼠模型（分为2组，agomiR-NC、agomiR-27b-3p）

给药方式：尾静脉注射

给药剂量：0.3 mol/kg

给药频率：每周1次，持续1个月

 

Fig6. 注射agomiR-27b-3p加速了ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成

 

参考文献：Tang Y, Yang L J, Liu H, et al. Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis[J]. Cell Reports, 2023, 42(1).

 

 

客户应用案例7：

Cellular & Molecular Biology Letters（IF8.3）丨A frog peptide provides new strategies for the intervention against skin wound healing

疾病模型：皮肤创伤愈合（全层皮肤损伤的SD大鼠模型作为实验动物模型）

动物模型：全层皮肤损伤SD大鼠模型（分为2组，agomir NC、miR-632 agomir）

给药方式：皮下注射

给药剂量：5 nM

给药频率：手术后第0天、第4天注射

 

Fig7. 注射miR-632 agomir促进l 大鼠皮肤创面再生

 

参考文献：Li C, Fu Z, Jin T, et al. A frog peptide provides new strategies for the intervention against skin wound healing[J]. Cellular & Molecular Biology Letters, 2023, 28(1): 1-32.

 

 

客户应用案例8：

Biomedicine & Pharmacotherapy（IF7.5）丨Rgl-exomiR-7972, a novel plant exosomal microRNA derived from fresh Rehmanniae Radix, ameliorated lipopolysaccharide-induced acute lung injury and gut dysbiosis

疾病模型：急性肺损伤和肠道失调（将BALB/c雄性小鼠麻醉，然后气管内注射LPS(32 mg/kg) 2 h，以构建LPS诱导的肺损伤小鼠模型）

动物模型：LPS诱导的肺损伤小鼠模型（分为2组，agomir NC、miR-7972 agomir）

给药方式：静脉注射

给药剂量：200 nmol

给药频率：每天1次、连续3天

 

Fig8. 注射miR-7972 agomir可抑制LPS诱导的炎症

 

参考文献：Qiu F S, Wang J F, Guo M Y, et al. Rgl-exomiR-7972, a novel plant exosomal microRNA derived from fresh Rehmanniae Radix, ameliorated lipopolysaccharide-induced acute lung injury and gut dysbiosis[J]. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2023, 165: 115007.

 

更多动物用miRNA agomir应用案例持续更新中，敬请期待……