反义寡核苷酸（ASOs）是一种短的、化学合成的单链寡核苷酸，通过对其骨架和糖基进行修饰，可增加其稳定性、药理特性以及与靶标的结合，并通常具有较小的毒性。常用于细胞和动物体内基因功能研究以及ASO核酸药物的开发等。

 

经过化学修饰的ASOs可以通过多种作用机制发挥作用。常见的一种作用方式是与RNA结合，形成RNA&DNA杂合体，依赖于RNase H发挥作用，从而导致靶标mRNA的降解，主要适用于干扰细胞核内的lncRNA/circRNA/mRNA等。

 

（图片来源于：Vickers and Crooke, 2015）

 

锐博生物采用国际先进的寡核苷酸合成和修饰技术，可针对lncRNA/circRNA/mRNA不同序列设计高特异性ASO序列，所合成的ASO序列是经过特殊化学修饰的单链RNA&DNA杂合体，极大地提高了其在细胞及动物体内的稳定性，可同时干扰胞质和核内的靶标RNA，亦可用于体内实验。并且相对病毒载体，合成周期短，适于后续ASO核酸药的研发。

 

动物用ASO体内给药方法大致亦可分为系统给药和局部给药，系统给药一般为5-20nmol，局部给药为1-10nmol，也可根据实验方案灵活设定给药剂量和频次，探索更佳的实验条件。

 

本期文章小编给大家更新了几篇关于动物用ASO给药方式的客户应用案例，希望能够对正在或即将要做动物实验的各位小伙伴有一定的帮助！

 

 

应用案例1：

Molecular Cancer（IF37.3）丨Extracellular vesicle-circEHD2 promotes the progression of renal cell carcinoma by activating cancer-associated fibroblasts

 

研究模型：肾细胞癌（①将约2×106个OSRC-2细胞皮下注射到每只小鼠的左侧，以构建皮下异种移植肿瘤模型；②将~1×106个OSRC-2细胞注射到每只小鼠的左肾包膜下，以构建原位异种移植肿瘤模型）

动物模型：①皮下异种移植小鼠模型；②原位异种移植小鼠模型（分成2组，circEHD2-ASO、ASO-Ctrl）

给药方式：①瘤内注射；②尾静脉注射

给药剂量：①5 nmol（瘤内注射）；②10 nmol（瘤内注射）

给药频率：每3天注射一次，连续4周

 

Fig1. 注射circEHD2-ASO抑制体内RCC的生长

 

参考文献：He T, Zhang Q, Xu P, et al. Extracellular vesicle-circEHD2 promotes the progression of renal cell carcinoma by activating cancer-associated fibroblasts[J]. Molecular Cancer, 2023, 22(1): 1-25.

 

 

   

应用案例2：

Advanced Science（IF15.1）丨Estrogen-Induced LncRNA, LINC02568, Promotes Estrogen Receptor-Positive Breast Cancer Development and Drug Resistance Through Both In Trans and In Cis Mechanisms

 

研究模型：雌激素受体阳性乳腺癌（将5×106个MCF7细胞皮下植入裸鼠体内，每2天在颈部刷雌激素(E2, 10−2 M)，直到肿瘤大小达到约100 mm3，构建异种移植裸鼠模型）

动物模型：异种移植小鼠模型（分为2组，ASO-CTL、ASO-LINC02568）

给药方式：瘤内注射/静脉注射

给药剂量：5 nmol（瘤内注射）/10nmol（静脉注射）

给药频率：每2天注射一次，注射8次

 

Fig2. 注射ASO-LINC01977显著降低了雌激素诱导的肿瘤生长

 

参考文献：Chen X, Ding J, Hu G, et al. Estrogen‐Induced LncRNA, LINC02568, Promotes Estrogen Receptor‐Positive Breast Cancer Development and Drug Resistance Through Both In Trans and In Cis Mechanisms[J]. Advanced Science, 2023: 2206663.

 

 

   

应用案例3：

The EMBO Journal（IF11.4）丨CircPVT1 promotes ER‐positive breast tumorigenesis and drug resistance by targeting ESR1 and MAVS

 

研究模型：雌激素受体阳性乳腺癌（将1 × 107个MCF7细胞皮下植入于4-6周龄雌性BALB/c裸鼠体内，实验期间，每只裸鼠每3天刷一次雌激素(E2, 10−2 M)，以维持异种移植肿瘤的生长，构建异种移植小鼠模型）

动物模型：异种移植小鼠模型（分为4组，分别为ASO-CTL、ASO-circPVT1、ASO-CTL + ICI、ASO-circPVT1 + ICI）

给药方式：瘤内注射

给药剂量：5 nmol

给药频率：每3天注射一次，持续3周

 

Fig3. 注射ASO-circPVT1可显著降低肿瘤生长，且与ICI联合治疗对肿瘤生长具有协同作用

 

参考文献：Yi J, Wang L, Hu G, et al. CircPVT1 promotes ER‐positive breast tumorigenesis and drug resistance by targeting ESR1 and MAVS[J]. The EMBO Journal, 2023: e112408.

 

 

   

应用案例4：

Journal of Experimental & Clinical Cancer Research（IF11.3）丨Energy stress-induced circZFR enhances oxidative phosphorylation in lung adenocarcinoma via regulating alternative splicing

 

研究模型：肺腺癌（将原发性肺腺癌组织样本分成约2mm块，并直接植入4–6周龄雌性BALB/c裸鼠皮下间隙，以构建PDTX模型）

动物模型：PDTX小鼠模型（分为2组：ASO-circZFR、ASO-NC）

给药方式：瘤内注射

给药剂量：10 nmol

给药频率：每周2次，持续4周

 

Fig4. 注射ASO-circZFR显著减弱了肿瘤生长

 

参考文献：Ma Z, Chen H, Xia Z, et al. Energy stress-induced circZFR enhances oxidative phosphorylation in lung adenocarcinoma via regulating alternative splicing[J]. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2023, 42(1): 169.

 

 

   

应用案例5：

Cell Death & Disease（IF9.0）丨Post-transcriptional modification of m6A methylase METTL3 regulates ERK-induced androgen-deprived treatment resistance prostate cancer

 

研究模型：前列腺癌（皮下注射PCa细胞2周后，将C4-2R肿瘤小鼠随机分为ASO-con组和ASO-2组。小鼠于第2~6周给予10 mg/kg恩杂鲁胺处理）

动物模型：异种移植小鼠模型（分为2组，分别为ASO-con、ASO-2）

给药方式：腹腔注射

给药剂量：15 mg/kg

给药频率：治疗1 d后休息1 d，共26 d

 

Fig5. 注射ASO-2和恩杂鲁胺导致肿瘤增值率显著更低

 

参考文献：Li Y, Zhu S, Chen Y, et al. Post-transcriptional modification of m6A methylase METTL3 regulates ERK-induced androgen-deprived treatment resistance prostate cancer[J]. Cell Death & Disease, 2023, 14(4): 289.

 

更多动物用ASO应用案例持续更新中，敬请期待……