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锐博生物总部位于广州市黄埔区广州开发区,是一家以核酸技术为核心,为基因功能、细胞生物学及药物研究提供产品与技术服务,以一体化核酸药 CDMO 服务为主导,致力于让新一代核酸药从概念走向商业化的国家火炬计划重点高新技术企业,是中国核酸行业的领军企业之一,拥有国家级博士后科研工作站。公司立足于基础生命科学与医学研究,创始人由国家重大人才工程入选者和诺贝尔生理/医学奖获得者领衔,以国际化视野和技术平台实力,提供高品质的寡核酸 Oligo 合成修饰、CRISPR-Cas9、RNAi、非编码 RNA、细胞分析、外泌体提取、DNA 提取、PCR 扩增、qRT-PCR 试剂盒及引物等,提供高内涵细胞成像及筛选、载体构建、动物实验、高通量测序、生信分析、RNA 体外转录、外泌体检测、qPCR 检测等技术服务,提供闻名业界的核酸药 GMP 生产 CDMO 服务。通过跨学科、多平台、上下游贯通的综合技术优势,赢得了国内外客户的信赖和赞誉。公司申请专利71项,其中已授权专利 21 项。“锐博生物RiboBio”是中国高品质核酸产品代名词之一,为国内外超过 5000 家机构提供产品或服务,客户 SCI 文章累计超过 25,000 多篇,合作客户包括诺贝尔奖得主实验室、知名科研机构和全球制药公司,锐博生物是亚洲知名的寡核酸原料药生产企业之一,2016年获得中国药监局颁发的寡核酸原料药生产许可证,现已跻身于全球核酸药 CDMO 的知名企业行列。锐博生物建立了与国际接轨的大规模cGMP生产基地,正在打造国际领先的大规模寡核酸 CMO 基地。锐博生物推动国内外核酸科学与技术的交流与合作,连续多年承办代表行业风向标的中国核酸国际论坛(CNAF)和非编码RNA与表观遗传学研究交流会,获批建立国家级博士后科研工作站,承担多项国家及省市重点科研项目。锐博生物致力于提供国际一流的核酸产品与服务,构建国际一流的合作平台与伙伴关系,培养国际一流的智慧型创新人才,为不断满足未来生命科学与医学研究及转化的需求而贡献力量。公司秉承“以创新求发展,以品质铸未来,以诚信待客户”的发展理念,追求“创新永不停”!
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【更新20230314】动物用agomir产品案例应用策略解析丨含动物造模、实验处理、给药方式、给药剂量……

人阅读 发布时间:2023-04-10 11:12

MicrONTM miRNA agomir是经过特殊化学修饰的miRNA激动剂,可直接注射于动物体内,用于模仿内源性miRNA。相比细胞用miRNA mimic,动物用miRNA agomir具有更高的稳定性和miRNA活性,更易通过细胞膜、细胞间隙而富集于靶细胞。在动物实验中agomir通常可以通过系统或局部注射等方法进行给药。关于科研实验中的给药方式一般没有固定的模式,给药方式应该根据具体的实验灵活设计,在实际实验过程中不断调整调整和优化。
 

小编之前已经给大家整理一些关于动物用agomir产品的客户应用案例,详情请见:

1、动物用agomir产品案例应用策略解析(20210623)丨含动物造模、实验处理、给药方式、给药剂量……

2、【更新】动物用agomir产品案例应用策略解析(20211025)丨含给药方式、给药剂量、动物造模、实验处理……

3、【更新20220725】动物用miRNA激动剂案例应用策略解析丨含给药方式、给药剂量、动物造模、实验处理……

 

本期文章小编给大家带来的是关于动物用miRNA agomir给药方式的客户应用案例,我们也将不定时地更新更多miRNA agomir在动物体内的应用策略,希望能够对正在或即将要做动物实验的各位小伙伴有一定的帮助!


 

锐博生物miRNA agomir

中文名:miRNA激动剂

功能:模仿内源性的miRNA

纯化方式:in vivo(Standard in vivo)

稳定性:经特殊化学修饰,稳定性高

给药方式:局部给药(1-10 nmol);系统给药(5-20 nmol)

作用方式:双链RNA,作用链为正义链,通过模拟miRNA进入miRISC复合物来调节靶mRNA的表达而发挥作用



 

客户应用案例1:

PNAS(IF12.779)丨Glutamate–GABA imbalance mediated by miR-8-5p and its STTM regulates phase-related behavior of locusts


疾病模型:蝗灾形成、蝗虫的相位相关行为(2d龄四龄独居若虫)

动物模型:独居蝗虫(分为2组,agomir-8-5p组、NC组)

给药方式:脑部注射

给药剂量:42 pmol,200 mM

给药频率:所有注射均在解剖镜下使用具有玻璃微量移液管尖的纳升注射器进行给药。处理若虫在24或48h后进行行为分析。

Fig1. 脑部注射agomir-8-5p(mir-8-5p Ag)的独居蝗虫表现出显著但不完全的群居行为转变(Pgreg=0.49),38.4%的蝗虫转移到0.8~1.0的Pgreg区间


参考文献:Yang M, Du B, Xu L, et al. Glutamate–GABA imbalance mediated by miR-8-5p and its STTM regulates phase-related behavior of locusts[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2023, 120(1): e2215660120.



 

客户应用案例2:

PNAS(IF12.779)丨Histone methylation-mediated microRNA-32-5p down-regulation in sensory neurons regulates pain behaviors via targeting Cav3. 2 channels

 

疾病模型:神经性疼痛(经口内入路,通过左眶下神经慢性压迫性损伤(CCI-ION)产生三叉神经性疼痛模型。即在用异氟醚isoflurane麻醉后,从第一磨牙开始,沿着大鼠颊粘膜中的牙龈囊边缘做一个约1厘米的切口。使用玻璃棒在眶下孔附近解剖左侧ION。两条缝合线(4-0丝)松散地缠绕在ION周围,彼此相距3-4毫米。sham组仅接受单侧神经暴露,使用相同的程序而不进行结扎)

动物模型:大鼠三叉神经性疼痛模型(随机分为4组,分别为sham+agomir-NC、sham+agomir-32、CCI-ION + agomir-NC、CCI-ION + agomir-32)

给药方式:三叉神经节内注射

给药剂量:50μM

给药频率:针尖端于三叉神经节(TG)的内侧, 3μl试剂在5min内缓慢地注入,注射后保持原位10 min

Fig2. 在CCI-ION后第14天,三叉神经节内注射 mir-32-5p(agomir-32)减弱了机械异常性疼痛


参考文献:Qi R, Cao J, Sun Y, et al. Histone methylation-mediated microRNA-32-5p down-regulation in sensory neurons regulates pain behaviors via targeting Cav3. 2 channels[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2022, 119(14): e2117209119.



 

客户应用案例3:

Cell Reports(IF9.995)丨Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis

 

疾病模型:肥胖、内皮细胞炎症和动脉粥样硬化(6-8周龄雄性ApoE-/-小鼠,喂养3-4个月的WD,WD喂养2个月后,尾静脉注射agomiRs)

动物模型:雄性ApoE-/-小鼠模型(分为2组,agomiR-27b-3p组、scramble agomiRs组)

给药方式:尾静脉注射

给药剂量:0.3 mol/kg

给药频率:每周一次,持续1个月


Fig3. 尾静脉注射agomiR-27b-3p加速了ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成


参考文献:Tang Y, Yang L J, Liu H, et al. Exosomal miR-27b-3p secreted by visceral adipocytes contributes to endothelial inflammation and atherogenesis[J]. Cell Reports, 2023, 42(1): 111948.



 

客户应用案例4:

Cell Reports(IF9.995)丨m6A modification of circSPECC1 suppresses RPE oxidative damage and maintains retinal homeostasis

 

疾病模型:视网膜色素上皮(RPE)氧化损伤、视网膜稳态(采用6周龄C57BL/6J小鼠作为动物模型)

动物模型:6周龄C57BL/6J小鼠(分为2组,NC agomir组、miR-145-5p agomir组)

给药方式:视网膜下空间注射

给药剂量:1nmol

给药频率:采用33标准尺的针将1μL含有1 nmol NC agomir/miR-145-5p agomir的溶液注射到小鼠视网膜下空间


Fig4. 注射miR-145-5p agomir可导致小鼠章动运动的次数和时间减少,表明OMR降低和视觉能力受损


参考文献:Chen X, Wang Y, Wang J N, et al. m6A modification of circSPECC1 suppresses RPE oxidative damage and maintains retinal homeostasis[J]. Cell Reports, 2022, 41(7): 111671.



 

客户应用案例5:

Journal of Neuroinflammation(IF9.587)丨Transcriptome profiling of microRNAs reveals potential mechanisms of manual therapy alleviating neuropathic pain through microRNA-547-3p-mediated Map4k4/NF-κb signaling pathway

 

疾病模型:腰椎间盘突出、神经性疼痛(简单地说,将大鼠麻醉并从右侧钝性分离椎旁肌肉,露出L4和L5椎间孔。将两根长4mm、直径0.6 mm的L型不锈钢棒分别植入L4和L5椎间孔,与脊柱成30°角,对DRG产生稳定压力,以构建背根神经节慢性压迫CCD模型)

动物模型:背根神经节慢性压迫CCD大鼠模型(分为2组,NC组、miR-547-3p agomir组)

给药方式:鞘内注射

给药剂量:10nmol

给药频率:术后第4天开始,每周2次,注射6次


Fig5. 鞘内注射miR-547-3p agomir的大鼠PWT(机械痛觉过敏)和PWL(热痛觉过敏)均呈下降趋势,但从第7天起同一时间点均显著高于对照组


参考文献:Yao C, Ren J, Huang R, et al. Transcriptome profiling of microRNAs reveals potential mechanisms of manual therapy alleviating neuropathic pain through microRNA-547-3p-mediated Map4k4/NF-κb signaling pathway[J]. Journal of Neuroinflammation, 2022, 19(1): 211.



 

客户应用案例6:

Diabetes Research and Clinical Practice(IF8.180)丨Demethylation of miR-299-5p by aerobic exercise relieves insulin resistance in the vascular endothelium by repressing resistin

 

疾病模型:2型糖尿病、胰岛素抵抗IR(从88只雄性7周龄C57BL / 6N小鼠中随机选择8只作为正常对照,并给予正常饮食12周,而其他80只小鼠给予45%Kcal高脂肪饮食12周以建立IR小鼠模型。12周后,通过葡萄糖耐量试验GTT和胰岛素耐量试验ITT评估IR模型)

动物模型:IR小鼠模型(分为2组,NC agomir组、miR-299-5p agomir组)

给药方式:尾静脉注射

给药剂量:50 mg/kg

给药频率:在IR模型的第四周开始,每隔一天注射一次,共5次


Fig6. 注射miR-299-5p agomir增强了IR诱导小鼠的葡萄糖耐量和胰岛素敏感性


参考文献:Cai Y, Wang M, Zong Y, et al. Demethylation of miR-299-5p by aerobic exercise relieves insulin resistance in the vascular endothelium by repressing resistin[J]. Diabetes Research and Clinical Practice, 2023, 195: 110176.




更多动物用miRNA agomir应用案例持续更新中,敬请期待……







 

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